韓国のセイヨウミツバチのコロニーにおける Tyrophagus curvipenis (ダニ: ダニ科) の初の同定と病原体の検出

Scientific Reports volume 13、記事番号: 9469 (2023) この記事を引用

メトリクスの詳細

Tyrophagus 属のダニ (Acari: ダニ科) は、最も広く分布しているダニの 1 つです。この属の種は、保管されている製品や作物に被害を与え、人間の健康に脅威を与えます。ただし、Tyrophagus spp. の影響。養蜂に関してはまだ不明です。 2022年、韓国の忠清南道で5つの養蜂場内でのチロファガス種の同定に焦点を当てた研究が実施された。その具体的な目的は、この地域のミツバチのコロニーの死亡率が高いと報告されていることに対応して、ツメダニの存在を調査することでした。ミトコンドリア遺伝子シトクロム-cオキシダーゼサブユニット1(CO1)を用いた形態学的同定と系統解析により、韓国のミツバチのコロニーにダニ種Tyrophagus curvipenisの存在が初めて確認された。このダニからは、ウイルス性病原体 (変形翅ウイルス、DWV) と原虫性病原体 (トリパノソーマ属) の 2 つのミツバチ病原体が検出されました。ダニの中に 2 つのミツバチ病原体が存在することは、このダニが関連するミツバチの病気の蔓延に寄与している可能性があることを示唆しています。しかし、ミツバチの健康に対するダニ T. curvipenis の直接的な影響は依然として不明であり、さらに調査する必要があります。

ミツバチ (Apis mellifera) は作物や野生植物の重要な花粉媒介者であり、蜂蜜、ローヤルゼリー、プロポリスなどの重要な産物を提供することで人間の生活に不可欠な役割を果たしています。しかし、気候変動と病原菌の蔓延によるミツバチのコロニーの喪失は世界中で発生しています1、2、3。ミツバチの死の主な原因の 1 つは、Varroa spp. などのダニです。および Tropilaelaps spp. はミツバチを餌とし、ミツバチにおける病気の伝染の媒介者です4、5、6、7。ベクターを介した感染は病原体の蔓延を大幅に増加させ、感染したミツバチのコロニーの崩壊につながります。最近ミツバチのコロニー喪失率が増加していることは、養蜂家や研究者にとって大きな懸念となっています。コロニーの損失率は多くの国で 36.5% に達し 8、米国では 2018 年から 2019 年に約 37.7% の損失が報告されました 9。大韓民国 (ROK) では、ミツバチの受粉価値は 59 億ドルと推定されており、これは果物と野菜の生産価値の約 50% に相当します10。しかし、国内のミツバチのコロニーの約 18% が失われた理由は不明です 11。したがって、国内の養蜂に悪影響を与える要因を特定することが重要です。

Tyrophagus 属のダニは、植物や動物の宿主だけでなく、自然界や人為起源の生息地を含むさまざまな生息地に世界中に分布しています12、13、14。ティロファガスのいくつかの種は、温室野菜や観賞用の花などの経済作物に被害を与えます15、16。ティロファガスはダニ上目、ダニ科に属し、世界中で記録されている約 35 種が含まれています 12,17。 Tyrophagus curvipenis (ダニ: Acaridea) はコスタリカとロシアのさまざまな動物宿主で報告されており 18、ニュージーランド、フランス、オーストラリア、ポルトガルのいくつかの植物でも報告されています 12。 Fain と Fauvel は、ポルトガルの温室の木造構造物から分離された T. curvipenis ダニを最初に報告し 19、ダニが時折蘭の花に生息し、その花粉を食べる可能性があることを記録しました 19。いくつかの種の Tyrophagus (T. putrescentiae、T. curvipenis、T. tropicus、T. debrivorus、T. similis、T. longgior、T. mixtus、T. perniciosus、T. vanheurni、および T. savasi など) が、ミツバチと関係がある20。 Tyrophagus putrescentiae (ダニ:ダニ科) は、ミツバチの死骸サンプル 21、マルハナバチの体内 22、ブラジルのミツバチの巣から検出されました。これは、汚染されたミツバチからの製品を摂取すると、ダニが人間の健康に害を及ぼす可能性があることを示唆しています23。残りの 9 種の Tyrophagus がミツバチに存在することを報告した研究はありません。これらのダニは、病原体または病原体感染のベクターの潜在的なキャリアとして機能し、間接的に人間に影響を与える可能性があります24、25、26。したがって、ミツバチに感染する T. curvipenis および他の種のダニの役割については、さらなる研究と評価が必要です。

ツメダニの同定は伝統的に形態学に基づいて行われてきました 12、14、27。しかし、この方法はツメダニのサイズが小さいため手間がかかり、形態的特徴を十分に理解する必要があり、時間がかかります。ミトコンドリア遺伝子チトクロム-cオキシダーゼサブユニット1（CO1）と核リボソーム内部転写スペーサー2（ITS2）に基づく分子法は、微細なダニの種を同定するための代替ツールとして提案されています28。

ミツバチのコロニー喪失の原因となる要因のスクリーニングは、冬にコロニーの崩壊が多かった地域から収集された死んだコロニーで実施されました。ここでは、2022年に韓国で死んだミツバチのコロニーからダニが検出され、収集されました。CO1とITS2の配列を分析してダニの種を特定しました。さらに、ダニによって媒介されるミツバチの病原体も特定されました。

ミツバチサンプルの顕微鏡検査により、ミツバチの体内に T. curvipenis ダニが存在し、侵入率は 100% であることが明らかになりました。ミツバチのコロニーから分離されたダニは、収集されたミツバチサンプルのさまざまな生活段階、つまり卵、幼虫、若虫、成虫の段階と関連していました（図1a〜d）。 Tyrophagus 属は成ダニにおいて独特の特徴を示し、その特異性細胞は白っぽいから半透明に見えます（図 1d）。ダニ種 T. curvipenis Fain & Fauvel (ダニ: Astigmata: ダニ科) の同定は、雌と雄の特徴に基づいて行われました。メスのダニは小さく、淡く、長さ 415 ～ 451 μm (n = 2)、幅 218 ～ 225 μm の固有種でした。チェリセラ 82 ～ 86 μm。前背シールドはほぼ五角形、眼点が顕著、長さ 83 ～ 84 μm、幅 86 ～ 84 μm。脊椎上剛毛（scx、31～36μm）は細長く、中等度または短い櫛歯が4つある。グランジャンの器官は指に似ており、その基底葉には2本の棘状の歯があります。子宮体毛のc1、d1、d2は他のものより比較的短い。 c1 (34 ～ 42 μm) は d2 (35 ～ 47 μm) より少し短く、d1 (117 ～ 109 μm) は c1 の長さの約 3.4 × および d2 の長さの 2.6 × です。精嚢管は狭く、精嚢嚢の基部はR型です（図2a）。寛骨板 II は広三角形で、アポデム II の頂点を越えて遠位に延び、後縁の 1/3 がわずかに凹面になっています。足根骨 I ω1 細長く、円筒形で頂点がわずかに広がっています。足根骨 II ω 細長く、ほぼ円筒形です。 IV 足根骨の剛毛 ω と r (補足図 S1)。

ミツバチ (Apis mellifera) で検出された Tyrophagus curvipenis のさまざまな段階。アカロイドダニの正体は、位相差顕微鏡を使用して形態学的特徴を分析することによって決定されました。ダニのさまざまな生存段階が表示されます: 卵 (a)、幼虫 (b)、若虫 (c)、成虫 (d)。

Tyrophagus curvipenis の形態学的特徴付け。ツメダニの同定は、剛毛 ve の位置、剛毛 scx の形状に基づいていました。 (a) 雌、c1、d1、d2 剛毛の大きさ、これらの剛毛と後部剛毛の間の距離、雌の精嚢の形状の比較、(b) 雄、S 字型の刺し毛と均等に配置された 2 つの吸盤足根骨IVにあります。

オスはメスよりも小さく、イディオソーマの長さは 319 μm (n = 1)、幅は 196 μm でした。鋏角 71 μm; 女性と同様に、眼点、寛骨板 I および II、およびソレニディア I ω1 および II ω。 S字型に曲がったaedeagus。 2つの吸盤は足根骨IVに均等に分布しています（図2b）。

この種が属する科は、顕微鏡で観察された形態学的特徴に基づいて決定できます。形態的特徴は最初の同定には非常に役立ちますが、正確な種を正確に区別するのは困難な場合があります。同定を確認するために、ツメダニの CO1 遺伝子領域と ITS2 遺伝子領域を標的とする種特異的プライマーペアを設計しました。 CO1遺伝子とITS2遺伝子を増幅するためのPCR反応条件の最適化に成功しました。次いで、配列を配列分析によって決定した。成虫ダニおよび卵サンプルからの CO1 および ITS2 領域の増幅により、それぞれ 379 および 500 bp の予想長さのバンドが生成されました (図 3a)。増幅された領域の配列は、成体サンプルと卵サンプル間で 100% 類似していました。得られた CO1 配列を GenBank データベース (blast.ncbi.nlm.nih.gov) に対して検索したところ、コスタリカ由来の T. curvipenis (NCBI アクセッション番号: KY986270) と 100% の配列同一性、および T. curvipenis との 86.64% の類似性が明らかになりました。 putrescentiae (NCBI アクセッション番号: MH262448)。 T. curvipenis の IST2 配列は NCBI データベースでは入手できませんが、サンプルから単離された配列を GenBank データベースと照合して検索したところ、中国の T. putrescentiae との最も高い類似性が 91.78% であることが示されました (NCBI アクセッション番号: GQ205623. 1)。さらに、成人サンプルからの ITS2 増幅では非特異的バンド (長さ約 1.7 kb) が見られました (図 3b)。予期しないバンドが配列決定のために抽出されました。しかし、シーケンス結果が不十分であったため、結果は不明でした。

ミツバチから分離されたダニの CO1 および ITS2 領域の増幅。 (a) CO1 の PCR 産物、(b) ITS2 の PCR 産物。 PCR産物は1%アガロースゲルで確認しました。レーン M は 100 bp DNA ラダーです。レーン 1 と 2 は、それぞれ卵サンプルと成体サンプルの PCR 産物です。レーン「-」は、DNA テンプレートを含まないネガティブコントロールです。サンプル DNA のアンプリコンサイズは塩基対 (bp) で示されます。

CO1 遺伝子配列に基づく系統解析により、収集されたダニの姉妹はコスタリカの鳥の巣から収集された T. curvipenis 分離株 AD2025 と位置づけられ、両者はロシアとコスタリカの植物 (モモおよびハヤトウリ) から分離された T. curvipenis と同じクレードに属していました。リカ（図4）。

CO1 遺伝子の配列に基づく系統発生的隣接結合ツリー。種名、NCBI アクセッション番号、およびアクセッションの起源が各配列に示されています。この研究でミツバチのサンプルで特定されたダニは太字で示されています。

15 個のミツバチのサンプルからの病原体検出により、ミツバチのサンプルが DWV、BQCV、およびトリパノソーマに感染していることが示されました (補足表 S1)。そこで、ダニへのミツバチ病原体感染の可能性を特定するために、ダニから抽出した全核酸を用いた病原体検出を実施した。ミツバチの 2 つの病原体 (DWV とトリパノソーマ) が、ダニの卵と成虫のサンプルから検出されました。さらに、ダニが収集された同じコロニーからのミツバチのサンプル中に 2 つの病原体が存在していました。病原体の同一性は、逆転写リアルタイム PCR (RT-qPCR) を使用して確認され、DWV およびトリパノソーマについてそれぞれ 199 bp および 276 bp のバンドが生成されました (図 5 および 6)。

ミツバチおよびダニのサンプルからの変形翅ウイルス (DWV) の検出。 DWV の陽性検出は、RT-qPCR の増幅曲線で確認されました (a)。結果は、アガロースゲル上で予想されたバンド (199 bp 長) を視覚化することによって確認されました (b)。レーン M は 100 bp DNA マーカーです。レーン 1 および 2 は、それぞれ Tyrophagus curvipenis の卵サンプルと成体サンプルから増幅されたバンドです。レーン 3 および 4 は、2 つのコロニーから収集されたミツバチのサンプルの結果を示しています。レーン「－」は、ＤＮＡ鋳型を含まないネガティブコントロールであり、レーン「＋」は、ＤＷＶの組換えＤＮＡを使用するポジティブコントロールである。

ミツバチおよびダニのサンプルからのトリパノソーマの検出。リアルタイム PCR (a) におけるトリパノソーマの陽性検出は、電気泳動アガロースゲル (b) 上の予想されたバンド (276 bp) で確認されました。レーン 1 と 2 は、それぞれ T. curvipenis の卵サンプルと成虫サンプルからの検出結果を示します。レーン 3 および 4 は、2 つの異なるコロニーから収集されたミツバチのサンプルからトリパノソーマを検出した結果です。ライン「-」は DNA テンプレートを使用しないネガティブコントロール、ライン「+」はトリパノソーマ組換え DNA を使用するポジティブコントロールです。

この研究では、韓国忠清南道公州市にある5つの養蜂場のコロニーでツメダニが検出され、同定されました。これは、国内の A. mellifera コロニーにおける T. curvipenis の最初の報告です。形態学的同定と CO1 遺伝子を使用した遺伝的同定により、このダニは T. curvipenis 種に属することが明らかになり、得られた配列の系統解析により、韓国産の T. curvipenis とコスタのツバメの巣から分離された個体との間に密接な関係があることが示されました。リカ（図4）。さらに、CO1 遺伝子領域のヌクレオチド類似性に基づく T. curvipenis の種系統発生は、この研究でミツバチから検出された T. curvipenis が、ロシアやコスタリカのモモやハヤトウリなどの植物で確認されたものと同じクラスターに属していることを示しました。。この結果は、この研究で特定された T. curvipenis の発生源は、ミツバチが花粉や蜜を集めるために訪れる花である可能性があることを示唆しています。 Tyrophagus 属で確認されている 35 種のうち 4 種、T. putrescentiae、T. similis、T. neiswanderi、および T.longior がこれまでに韓国で報告されています 29,30,31。したがって、ここで報告する Tyrophagus curvipenis は、韓国で新たに記録された種です。他の種と同様に、T. curvipenis はニュージーランドのミツバチの巣で発見されています 32。韓国（全羅南道完州郡）の T. putrescentiae は蜂の巣に生息し、瓦礫や花粉を食べることが報告されています 33。しかし、ミツバチの健康状態と巣箱内の T. curvipenis ダニの存在との関係は不明のままです。

分子法を使用して Tyrophagus 種を特定することに成功しました。 CO1 遺伝子配列に基づく分子法の結果は、形態学的特徴に基づく同定と一致しました。しかし、NCBI データベースで利用できる Tyrophagus 配列が限られているため、IST2 領域を使用して Tyrophagus ダニの種の同定を確認することはできませんでした。さらに、IST2プライマーペアは、成ダニから抽出された全DNAを使用して非特異的なバンドを増幅しました（図3b）。 CO1 遺伝子は、より大規模な配列データベースが寄託されているため、ツメダニの種の同定に潜在的により有益です。

Varroa や Tropilaelaps などの血リンパを吸うダニがミツバチに寄生すると、冬の間、コロニーの損失が増加し、ミツバチの病気の伝播が増加しました 4,6,7,34,35,36。ウイルス性、細菌性、および真菌性のミツバチ病原体が、Varroa ダニおよび Tropilaelaps ダニによって媒介されることが実証されています 36,37。この研究で検出された T. curvipenis ダニは、ミツバチのウイルス性病原体 (DWV) および原虫性病原体 (トリパノソーマ) に対して陽性でした。これらの病原体に感染するとコロニーが弱まり、ミツバチの冬季死亡率が増加します38、39、40。さらに、これらの病原体はダニが採取されたミツバチのサンプルからも検出され、ダニが巣の中でこのような病原体を媒介する可能性が高いことが示唆されました。さらに、一般的に貯蔵ダニとして知られるタイロファガスダニは、食品に含まれるカビを餌とします41,42。しかし、ミツバチの巣における T. curvipenis の食物源は依然として不明です。したがって、ミツバチに対する T. curvipenis ダニの影響を理解することは、ダニの予防と制御のための適切な方法を開発するのに役立ちます。さらに、一部のツメダニが動物や人間のアレルゲンとして特定されているため、蔓延しているコロニーから収集されたミツバチ製品を摂取する人間に対するダニの潜在的な影響を最小限に抑える必要があります43,44。観察された侵入率は 100% であり、調査対象の 5 か所の養蜂場でミツバチのコロニー内で中間の病気を媒介する可能性があるため、ツメダニは観察されたコロニーの喪失において潜在的に重要な役割を果たしている可能性があります。この研究で得られた知見は、ミツバチの健康に対するツメダニの侵入による影響を最小限に抑え、コロニー全体の生存率を向上させることを目的とした、的を絞った管理戦略の開発に貢献する可能性があります。コロニー減少の潜在的要因としてのツメダニの重要性を理解することで、その悪影響を軽減し、ミツバチ個体群の健康を守るための積極的な対策を講じることができます。

これは、韓国のミツバチのコロニーにおける T. curvipenis ダニの最初の記録であり、この研究はダニの中にミツバチの病原体 (DWV およびトリパノソーマ) が存在することを実証しました。この結果は、このダニがミツバチの病原体の拡散に重要な役割を果たしている可能性があることを示唆しています。しかし、T. curvipenis ダニがミツバチのコロニーの死滅に寄与したかどうかは、この研究では確認されていません。したがって、養蜂におけるこの敵とミツバチ病原体の生物学的媒介物の影響を理解し、蔓延しているミツバチのコロニーから収集された製品を摂取する人間に対するダニの潜在的なリスクを明らかにするには、さらなる研究が必要です。

2022年11月、韓国忠清南道公州市の養蜂場の死んだコロニーからミツバチのサンプルが収集されました。ダニ検査のため、5つの異なる養蜂場の15コロニーから合計45個のミツバチのサンプルが収集されました。解剖顕微鏡でダニの存在を確認しました。ミツバチの体表や毛からダニを採取した。ダニをホイヤー培地を用いてスライド上にマウントした。標本は Fan と Zhang12 に従って識別および測定されました。ここで使用されるすべての測定値はマイクロメートル単位です。種の同定後、ダニは遺伝子分析と病原体の検出に使用されました。

ミツバチのサンプルと収集したダニは、UltraPure™ 蒸留水 (Invitrogen、米国) を使用して 3 回洗浄され、全核酸抽出に使用されました。 Maxwell RSCウイルス全核酸精製キット(Promega、米国)を製造業者の指示に従って核酸抽出に使用した。抽出された核酸はミツバチの病原体の検出に使用されました。ダニゲノム DNA (gDNA) の抽出は、QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen, UK) を使用して、製造元の指示に従っていくつかの変更を加えて行いました 45。ミツバチの各コロニーから収集した成ダニ 10 匹またはダニの卵 4 匹をプールし、200 μL の ATL 緩衝液と 2.381 mm のスチールビーズ (韓国、ハナム) を含む 1.5 mL チューブに入れました。 5000 rpm で 15 秒間ホモジナイズした後、20 μL プロテイナーゼ K (50 μg/mL) を加え、混合物を 56 °C で 1 時間インキュベートしました。正確に 200 μL の溶解バッファーを溶液に添加し、溶液を 70 °C で 10 分間インキュベートしました。次に、98%エタノールを200μL加え、ボルテックスにより混合した。溶液をAIAampミニスピンカラムに移し、12,000×gで1分間遠心分離した。スピンカラムを洗浄緩衝液で２回洗浄した後、溶出緩衝液を用いてダニのゲノムＤＮＡを新しいチューブに溶出し、１２，０００×ｇで２分間遠心分離した。単離された DNA は、CO1 および ITS2 領域の PCR 増幅に使用されました。

各コロニーからのダニとミツバチのサンプルは、ミツバチとダニのサンプルの全核酸を使用してミツバチの病原体の存在について検査されました。検出の対象となったミツバチの病原体には、アメリカ悪臭株（AFB）、ヨーロッパ悪臭株（EFB）、Ascosphaera apis（ASCO）、Aspergillus flavus（ASP）、Nosema、Acarapis woodi（ACAR）、Apocephalus borealis（PHORID）、Sacbrood ウイルス（SBV）が含まれます。）、DWV、ブラッククイーン細胞ウイルス（BQCV）、慢性蜂麻痺ウイルス（CBPV）、カシミール蜂ウイルス（KBV）、急性蜂麻痺ウイルス（ABPV）、イスラエル急性麻痺ウイルス（IAPV）、セイヨウミツバチ糸状ウイルス（AmFV）、レイクシナイウイルス（LSV1、LSV2、LSV3、LSV4）、トリパノソーマ、バロアデストラクターウイルス-1（VDV-1; DWV-B）、および組換え変形翼ウイルス-バロアデストラクターウイルス-1（DWV-VDV-1）のクレード。病原体の検出は、RT-qPCR キット (LiliF ABPV/KBV/IAPV/CBPV リアルタイム RT-PCR キット、LifiF SBV/KSBV/DWV/BQCV リアルタイム RT-PCR キット [iNtRON Biotechnology、 Inc.、韓国]、Pobgen ミツバチ病原体検出キット [Postbio、韓国]、および iTaq ユニバーサル SYBR グリーンワンステップキット [Bio-Rad、米国])。ミツバチの病原体の検出に使用されるプライマーは、補足表 S2 および S3 に示されています。ミツバチのサンプルで検出された病原体は、PCR キットを使用したダニのサンプルでの検出の対象となりました。

ダニの CO1 および ITS2 領域は、ユニバーサルプライマーセット CO1-forward (5'-GTTTTGGGATATCTCTCATAC-3') および CO1-reverse (5'-GAGCAACAACATAATAAGTATC-3')46 を使用して増幅されました。 ITS2 フォワード (5'-CGACTTTCGAACGCATATTGC-3') および ITS2 リバース (5'-GCTTAAATTCAGGGGGTATATCTCG-3')47。各反応混合物 (20 μL) は、20 ng の gDNA テンプレート、1 μL の各プライマー (10 pmol)、AccuPower® PCR プレミックスおよびマスターミックス (Bioneer、韓国)、および ddH2O (20 μL にするため) で構成されました。 PCR サーマルサイクラープロトコルは次のように最適化されました。94 °C (5 分)。 94 °C (20 秒)、52 °C (30 秒)、および 68 °C (30 秒) を 5 サイクル。続いて、94 °C (20 秒)、50 °C (30 秒)、および 68 °C (30 秒) を 5 サイクル。 94 °C (20 秒)、48 °C (30 秒)、68 °C (30 秒) を 30 サイクル。そして最後の 94 °C (20 秒)、46 °C (30 秒)、68 °C (30 秒) の 30 サイクル。そして最後の伸長ステップは 68 °C (5 分間) です。 CO1(379bp)とITS2(500bp)のバンドをアガロースゲル電気泳動で確認した後、QIAquickゲル抽出キット(Qiagen社)を用いてバンドを抽出精製した。精製された PCR 産物は Cosmogenetech Co, Ltd. (ROK) によって配列決定されました。

さまざまな成体および卵のサンプルから同定されたヌクレオチド配列を、NCBI ヌクレオチドデータベースに対する BLASTn 検索に供しました。ヌクレオチド配列は、BioEdit および Cluster W ソフトウェアを使用してアラインメントされました 48,49。 CO1 配列に基づく系統樹は、MEGA7 ソフトウェア 51 で 1000 回のブートストラップ複製 50 による近隣結合法を使用して作成されました。

現在の研究中に生成または分析されたすべてのデータは、国立バイオテクノロジー情報センター (NCBI) リポジトリ、アクセッション番号: OQ121480 (ITS2) および OQ121363 (CO1) で入手できます。

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ダニのサンプルを提供してくださった養蜂家の方々に感謝いたします。この研究に関して貴重なコメントをくださった Heung Shik Lee 博士、Nyen Gi Jung 博士、Ju Haeng Hur 博士に特に感謝します。また、ダニの収集と顕微鏡作業を手伝ってくれた寄生虫・ミツバチ病研究室の Se Jeong Ahn 氏にも感謝します。この研究は、大韓民国動植物検疫庁 (認可番号 M-1543081-2022-24-02) の支援を受けました。

Thi-Thu Nguyen、Mi-Sun Yoo、A-Tai Truong の著者も同様に貢献しました。

寄生虫およびミツバチ疾患研究室、細菌疾患部門、動植物検疫庁、ミツバチ疾病管理センター、動植物健康研究部、39660、金泉市、大韓民国

ティ・トゥ・グエン、ミ・ソン・ユ、ア・タイ・チュオン、ソ・ユン・ユン、セ・ジ・リー、ドンホ・キム、スン・シーク・ユン、ユン・サンチョ

動植物検疫庁植物検疫局植物害虫防除課、金泉市、39660、大韓民国

イ・ジョンホ

タイグエン科学大学バイオテクノロジー学部、タイグエン、ベトナム

アタイ・チュオン

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構想と設計、TTN および YSC サンプルの収集と核酸、MSY、DHK、SYY、および SJL の分離。方法論、TTN、ATT、JHL、MSY。実験を実行しました: TTN、ATT、JHL、MSY。データの分析と解釈、TTN、ATT、MSY、SSY、および YSC の作成 - オリジナル草案の準備、TTN。執筆、レビューおよび編集、ATT、MSY、SSY、および YSC すべての著者がこの原稿の最終版を読んで承認しました。

ユン・サンチョへの手紙。

著者らは競合する利害関係を宣言していません。

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転載と許可

グエン、TT、ヨー、MS、チュオン、AT。他。韓国のセイヨウミツバチのコロニーで Tyrophagus curvipenis (ダニ: ダニ科) が初めて特定され、病原体が検出されました。 Sci Rep 13、9469 (2023)。 https://doi.org/10.1038/s41598-023-36695-z

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受信日: 2023 年 3 月 9 日

受理日: 2023 年 6 月 8 日

公開日: 2023 年 6 月 10 日

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-36695-z

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